蘇丹紅等油溶性非食用色素的快速紙層析測定法
方法編號：CDC-2041
1 適用范圍：本方法適用于蘇丹紅（1、2、3、4號）等油溶性非食用色素的現(xiàn)場快速檢測。
2 方法原理：根據(jù)蘇丹紅等油溶性非食用色素的化學(xué)極性不同，通過展開劑在試紙上的展開距離不同來確定確定組分的存在。
3 檢測試材（試劑盒組成）：快速層析紙，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ號系列蘇丹紅對照液，展開劑，毛細(xì)管。
4 樣品處理：取約1g樣品于容器中，加入2～4 mL乙酸乙酯，充分混勻，提取1min，靜置3min以上。
5 點(diǎn)樣：取一張層析紙，在端底向上約1cm處、平行相隔約1cm、用鉛筆畫出將要點(diǎn)樣的+字線或五個(gè)小點(diǎn)。取1支毛細(xì)管沾取樣品溶液的上層液，將其分別點(diǎn)在五個(gè)+字線上（樣品溶液顏色較淺時(shí)，可在每次點(diǎn)樣斑點(diǎn)揮干后重復(fù)點(diǎn)樣），斑點(diǎn)直徑控制在5毫米以內(nèi)。另取四支毛細(xì)管分別沾取蘇丹紅1、2、3、4號對照液少許分別點(diǎn)在樣品的原點(diǎn)上。
6 展開：取一個(gè)250mL以上的燒杯，加入約5mL展開劑，將層析紙（樣品端朝下）插入展開劑中靠在杯壁上，待展開劑延層析紙向上平行展開**層析紙頂端約1厘米處時(shí)取出層析紙，觀察結(jié)果。
7 結(jié)果判斷
7.1在本實(shí)驗(yàn)條件下，如果樣品在展開軌跡中出現(xiàn)斑點(diǎn)，其斑點(diǎn)展開（向上跑）的距離與某一對照液展開后的斑點(diǎn)距離相等、顏色相同或顏色雖淺卻相近時(shí)，即可判斷樣品中含有這一色素。
7.2我*允許使用的色素除天然色素外沒有油溶性色素，天然色素的化學(xué)極性往往很小，樣品中即使含有天然色素，展開后的色斑會在前沿之處出現(xiàn)淡色斑點(diǎn)或淡色條帶。
7.3如果對照物已經(jīng)展開，而樣品色斑在原處未動或展開的距離很小，表明這一色素為水溶性色素，可用水溶性色素檢測試劑來判斷其是食用的還是非食用的。
8 注意事項(xiàng)：
8.1本方法檢出限為點(diǎn)樣量10 µL,0.08µg 目視可見；**低檢出濃度8µg/mL。精確定量需要采用高效液相色譜儀。
8.2 檢測的樣品數(shù)量較多時(shí)，不必每張層析紙上都點(diǎn)對照液，可一次點(diǎn)幾個(gè)樣品，當(dāng)展開過程中出現(xiàn)斑點(diǎn)后，再做加入對照液實(shí)驗(yàn)。
8.3 蘇丹紅對照液的點(diǎn)樣量不要太多，以能夠展現(xiàn)斑點(diǎn)而無拖尾現(xiàn)象為宜。
8.4 展開劑的使用應(yīng)適量，液面高度應(yīng)控制在斑點(diǎn)以下，展開過程中層析紙不能傾倒，每展一張層析紙**好更換一次展開劑。
8.5 樣品展開時(shí)，燒杯上不要蓋蓋，以便于斑點(diǎn)的展開。當(dāng)環(huán)境溫度較低，斑點(diǎn)展開的距離較短；或環(huán)境溫度較高，展開劑展開到層析紙一半距離不再往上展時(shí)，應(yīng)重新操作并在燒杯上加蓋物品。
8.6 如果對照物展開后全部堆積到展開前沿處或原點(diǎn)處為移動，說明試劑或操作有問題，應(yīng)查明原因重新操作。
9 試劑質(zhì)量控制：將蘇丹紅系列對照液在試紙上按產(chǎn)品說明展開，應(yīng)明顯區(qū)分出不同的展開距離，否則試劑不可再用。
10 產(chǎn)品儲藏與效期：試劑閉光常溫保存，有效期為1年。
